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FISH(fluorescence in situ hybridization)技術(shù)是一種重要的非放射性原位雜交技術(shù)?;驹恚喝绻粰z測(cè)的染色體或DNA纖維切片上的靶DNA與所用的核酸探針是同源互補(bǔ)的,二者經(jīng)變性-退火-復(fù)性,即可形成靶DNA與核酸探針的雜交體。

產(chǎn)品型號(hào):
更新時(shí)間:2020-05-14
廠商性質(zhì):代理商
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FISH(fluorescence in situ hybridization)技術(shù)是一種重要的非放射性原位雜交技術(shù)。基本原理:如果被檢測(cè)的染色體或DNA纖維切片上的靶DNA與所用的核酸探針是同源互補(bǔ)的,二者經(jīng)變性-退火-復(fù)性,即可形成靶DNA與核酸探針的雜交體。

 

熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization, FISH)是在20世紀(jì)80年代末在放射性原位雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種非放射性分子細(xì)胞遺傳技術(shù),以熒光標(biāo)記取代同位素標(biāo)記而形成的一種新的原位雜交方法,探針首先與某種介導(dǎo)分子(reporter molecule)結(jié)合,雜交后再通過(guò)免疫細(xì)胞化學(xué)過(guò)程連接上熒光染料。FISH的基本原理是將DNA(或RNA)探針用特殊的核苷酸分子標(biāo)記,然后將探針直接雜交到染色體或DNA纖維切片上,再用與熒光素分子偶聯(lián)的單克隆抗體與探針?lè)肿犹禺愋越Y(jié)合來(lái)檢測(cè)DNA序列在染色體或DNA纖維切片上的定性、定位、相對(duì)定量分析。

 

基本步驟:

1.        玻片的準(zhǔn)備和樣品固定

2.        細(xì)胞或組織的預(yù)滲透處理

3.        靶DNA變性(DNA原位雜交)

4.        探針制備

5.        原位雜交過(guò)程

6.        雜交后洗滌

7.        探針(顯色)檢測(cè)

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